Experimentas: Experiments

Experiment: Koval. Immobilisierung von Invertase an Glas

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Typ

Lehrer-/ Schülerversuch SII

Kurzbeschreibung

Anlagerung eines Enzyms an eine dotierte Deckgläschen-Oberfläche

Beschreibung

Aus Natronlauge- und Essigsäure-Maßlösung wird gemäß Anleitung eine Acetat-Pufferlösung pH=4,6 bereitgestellt, ebenso die benötigten Reagenzlösungen. 3 Deckgläschen (DG) werden wie beschrieben vorbehandelt und auf der Oberflächen mit 1 Tropfen 3-Aminopropyl-trimethoxysilan benetzt. Das Vorhandensein der Aminogruppen auf der Glasoberfläche wird mittels TNBS-Lösung nachgewiesen, nachdem man ein DG mit kalt gesättigter Borax-Lösung behandelt hat. Die beiden anderen DG werden 15 min lang mit Glutardialdeyd-Lösung überdeckt, danach dreimal mit Pufferlösung abgespült. Der Nachweis der Aldehydgruppen wird an einem DG mittelös SCHIFFs Reagenz durchgeführt. Das verbleibende DG wird gemäß Anleitung in eine gepufferte Saccharose-Lösung und dann in Invertase-Lösung gebracht. Der Nachweis der Enzymaktivität erfolgt nach 5 min mittels 3,5-Dinitrosalicylsäure-Lösung.

Schadensrisiken

durch Einatmen / Hautkontakt

Gefahrstoffe

Name	Synonyme	Spezifikation	Signalwort	H- und EUH-Sätze
3-Aminopropyl-trimethoxysilan	3-(Trimethoxysilyl)propylamin		Gefahr	H315 H318
3,5-Dinitrosalicylsäure	2-Hydroxy-3,5-dinitrobenzoesäure		Achtung	H302 H318
Glutardialdehyd-Lösung	1.5-Pentandial-Lösung	wässrig, w=25%	Gefahr	EUH071 H314 H334 H317 H302 H410 H330 H335
di-Natriumtetraborat	Borax	wasserfrei	Gefahr	H360FD H319
Natronlauge	Natriumhydroxid-Lsg.	Maßlösung c= 1 mol/L	Gefahr	H314 H290
Schwefelsäure		konz. w: >15%	Gefahr	H290 H314
2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsäure-Lösung	TNBS, Picrylsulfonic acid solution	wässrig, ca. 1-molar	Gefahr	H314 H317