Experiment: Immobilisierung von Malat-Dehydrogenase

Typ Lehrer-/ Schülerversuch SII
Kurzbeschreibung Ein schwach basischer Ionenaustauscher als Trägermaterial
Beschreibung Vorbereitend wäscht man das Ionenaustauscherharz (Lewatit MP62) mit demin. Wasser und danach mit TRIS-Pufferlösung pH 7,5. Durch Mischen des Ionenaustauschers mit Pufferlösung und Malat-Dehydrogenase bzw. mit Trockenhefesuspension wird das Harz beladen. Nach nochmaligem Waschen mit Pufferlösung ist das Präparat fertig. Es hält im Kühlschrank mehrere Monate lang. Vergleichend prüft man die Reaktionszeit bzw. -intensität beim NADH-Abbau in gepufferter Oxalacetat-Lösung, zum einen mit der Malat-Dehydrogenase Stammlösung und zum anderen mit den beladenen Lewatit-Perlen. NADH-Nachweis-Reagenz dient zur Kontrolle des Prozesses.
Schadensrisiken durch Einatmen / Hautkontakt
Gefahrstoffe
NameSynonymeSpezifikationSignalwortPiktogrammeH- und EUH-Sätze
OxalessigsäureOxobutandisäure, OxobernsteinsäureGefahr
H319
Phenazin-methosulfatN-Methylphenazonium-methylsulfatAchtung
andere Stoffe demin. Wasser, TRIS-Pufferlösung pH 7,5, Lewatit MP62, Malat-Dehydrogenase, Trockenhefe-Suspension, Iodnitrotetrazoliumchlorid
Substitutionsargument Substitution nicht erforderlich: risikoarmer Standardversuch
Sicherheitshinweise
Vorkehrungen
Kategorien Aminosäuren/ Proteine/ Enzyme, Biochemische Prozesse/ Biotechnologie
Sammlungen Aulis: Handbuch der experimentellen Chemie
Quellen
AutorNameErscheinungsortISBNAusgabeSeiteandere Angaben
Glöckner et al. (Hrsg.)Handbuch der experimentellen Chemie SIIKöln 1997H. Wenck: Band 11/II Biochemie IIV 6.1.4.8
Autor Peter Slaby
bearbeitet 2015-05-25 18:10:27
erstellt 2015-05-25 17:52:52
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